STEM CELL
sábado, 8 de diciembre de 2018
sábado, 1 de diciembre de 2018
LAS CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES AUMENTA LA PRODUCCIÓN DE ESPECIES DE REACTIVO DE OXÍGENO DEPENDIENTE DE NOX2 Y LA DESTRUCCIÓN BACTERIANA EN MACRÓFAGOS DURANTE LA SEPSIS.
Se estudió la respuesta fenotípica y funcional de los
macrófagos humanos derivados de monocitos a la exposición MSC in
vitro. Se ha informado que las células madre /
estromales mesenquimales humanas (MSCs) producen un fenotipo de
tipo M2, activado alternativamente en los macrófagos. Además, las MSC
median el aclaramiento bacteriano efectivo en modelos de sepsis
preclínica. Por lo tanto, las MSC tienen una respuesta antimicrobiana y
antiinflamatoria. Las MSC indujeron dos fenotipos distintos: los
macrófagos tipo M2 ( morfología generalmente alargada, CD163+, acidificación
aguda del fagosoma, baja expresión de NOX2 y producción limitada de superóxido
fagosomal) y macrófagos tipo M1 caracterizados por altos niveles de producción
de superóxido fagosómico. También se observó una producción mejorada de
especies reactivas de oxígeno fagosómico en los macrófagos alveolares de un
modelo de roedor de sepsis inducida por neumonía. Las MSC
potenciaron la fagocitosis de macrófagos humanos de las bacterias no
opsonizadas y la eliminación bacteriana mejorada en comparación con los
macrófagos no tratados, además las MSC también mejoraron la fagocitosis y
la polarización de los macrófagos tipo M1 derivados de pacientes con sepsis
grave.
Tomado de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29519920
RATONES DE TIPO SALVAJE (WT), SP-D KNOCKOUT (KO) Y TRANSGÉNICOS SP-D HUMANIZADOS (HTG, EXPRESIÓN SP-D ESPECÍFICA DE PULMÓN) PARA ESTUDIAR EL PAPEL ESPECÍFICO DEL ÓRGANO DE SP-D EN NEUMONÍA.
La proteína surfactante D (SP-D) expresada en pulmón y
riñón desempeña funciones importantes en la inmunidad innata. El estudio actual
utiliza ratones de tipo salvaje (WT), SP-D knockout (KO) y transgénicos SP-D
humanizados (hTG, expresión SP-D específica de pulmón) para estudiar el papel
específico del órgano de SP-D en neumonía PCP.
Después de la infección, los ratones KO mostraron mayores
puntuaciones perjudiciales en pulmones
como en los riñones, y una función renal disminuida que los ratones WT y
hTG. Los ratones hTG mostraron una lesión pulmonar comparable pero una
lesión renal más grave en comparación con los ratones WT. El aumento de la
apoptosis tubular renal, la activación de NF-κB y las citocinas
proinflamatorias en el riñón de ratones KO se encontraron en comparación con
los ratones WT y hTG. En conjunto, SP-D atenúa la injuria renal aguda en la
sepsis mediante la modulación de la apoptosis renal, la inflamación y la
señalización de NF-κB.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS TRNSGENICOS:
Ventajas:
- Se generan especies mas resistentes y mejoradas.
- Ayuda a simular enfermedades para generar vacunas.
- Funcionan como fabricas biológicas.
- Por su modificaciones genéticas aumentan la producción y disminuyen costos.
- Obtener órganos para trasplantes humanos .
Desventajas:
- Generar resistencia a los antibióticos.
- Provocaría esterilización de semillas.
- Por una exagerada manipulación los alimentos podrían tornarse tóxicos.
- Los alimentos podrían generar alergias en seres humanos por la manipulación variada de sus genes.
- Bioterrorismo
Tomado de:
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6193952/
domingo, 25 de noviembre de 2018
ADN RECOMBINANTE
El ADN se recombina de forma natural mediante diversos procesos como reproducción sexual, transformación bacteriana e infección viral. En el caso de la hequilobacter pylori la tranformación le garantiza captar ADN libre que puede ser parte del cromosoma de otra bacteria e incluso de otra infección bacteriana; tambien hay transformación cuando captura diminutas moléculas de ADN plasmídico el mismo que le otorga a la bacteria vivir en ecosistemas nuevos; los ejemplos mas claros son las bacterias poseedoras de plasmidos resistentes a los antibióticos.
VACUNA QUE INDUCE INMUNOGENICIDAD Y PROTECCIÓN CONTRA PCP
Se ha realizado una Vacuna peptídica KEX1 recombinante en un
modelo de primate.
La inmunización con KEX1 indujo una fuerte respuesta
humoral que permaneció en niveles protectores a pesar del virus de la
inmunodeficiencia simia crónica / inmunosupresión inducida por VIH. Los
macacos inmunizados con KEX1 se protegieron de la neumonía por Pneumocystis,
en comparación con los animales inmunizados de manera simulada, después de la
inmunosupresión y la posterior exposición natural en el aire a Pneumocystis.
Estos datos respaldan el concepto de que la estimulación de
la memoria inmunológica preexistente a Pneumocystis con una
vacuna KEX1 recombinante antes de la inmunosupresión induce
respuestas de memoria duraderas y protección en el contexto de una
inmunosupresión crónica y compleja
domingo, 18 de noviembre de 2018
WESTERN BLOT
El análisis Western de complejos
unidos a GlcNAc de Pc confirma la reactividad de GlcNAc en extractos
de Pneumocystis . 1) Las preparaciones de pared celular de Pc se
separaron por PAGE, y se analizaron las proteínas Pc potenciales formadas por
complejo de GlcNAc mediante la incubación de la proteína CBD marcada con SNAP
seguida de la detección del anticuerpo anti-SNAP (Ab). Las concentraciones
de las preparaciones de proteína Pc total fueron las siguientes: carril 1 ,
100 μg; carril 2 , 50 μg; carril 3 , 25 μg. 2) Las
preparaciones de lisado de Pc total se trataron con tampón de reacción de
quitinasa solo o con 1 U de quitinasa de Streptomyces griseus durante
2 horas a 37ºC antes del análisis.
Los procedimientos en el
suplemento incluyen: detección por inmunofluorescencia de la reactividad de
GlcNAc en Pc , análisis Western de Pc GlcNAc complejado con
proteínas; verificación de genes biosintéticos de GlcNAc en
los genomas de Pc y Pneumocystis jirovecii.
Tomado de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5359649/
sábado, 10 de noviembre de 2018
PRUEBA DE PCR PARA DIAGNOSTICAR NEUMONÍA POR PNEUMOCYSTIS JIRUVECII A PARTIR DE MUESTRA DE LAVADO BRONCOALVEOLAR
TEMA: Pneumocytosis y PCR cuantitativa
OBJETIVO: Estandarizar un método cuantitativo que permita comparar carga de pneumocystis jirovecii en muestras no invasivas y muestras de tejido pulmonar de pacientes colonizados.
MUESTRA: BAL
TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO EXTRAIDO: ADN de P. Jiruvecii
TIPO DE PCR: PCR cuantitativa
GEN: MSG 156 pb
EXTRACION DE ADN: Se homogenizo el tejido pulmonar, se depuró y se purifico el DNA total en el kit de uso comercial QIAamp DNA mini Kit. El aislamiento del gen blanco se realizo mediante PCR, utilizando los partidores PC MSG Forward y PC MSG Reverse y la enzima pfu DNA polimerasa para amplificar parte de la región altamente conservado del MSG, un fragmento de 156 pb.
SENCIBILIDAD: 38% a 58% pacientes sin VIH
ESPECIFICIDAD: 100%
Tomado de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29789160
SENCIBILIDAD: 38% a 58% pacientes sin VIH
90% en caso de PCP en pacientes infectados por el VIH
ESPECIFICIDAD: 100%
Tomado de: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29789160
jueves, 1 de noviembre de 2018
PRUEBA DE TAMIZAJE Y PRUEBA CONFIRMATORIA
PRUEBA DE TAMIZAJE
La prueba de tamizaje mas idónea para esta enfermedad es la tomografía axial computarizada ya que posee una mayor sensibilidad que la radiografiar de tórax para el diagnostico de la enfermedad.
ante sospecha de neumonía Pneumocystis jirovecii y radiografías simples normales se puede realizar una tomografía de alta resoluciones de tórax. La imagen típica muestra aumento de la atenuación con opacidad en vidrio despulido con afección bilateral que puede estar acompañada de múltiples lesiones quísticas o neumatoceles.
PRUEBA CONFIRMATORIA
La reacción en cadena de la polimeraza PCR, es una técnica sumamente sensible y especifica. El gen mtLSU rRNA es uno de los mas utilizados cmo blanco para fines de diagnostico, de epidemiología molecular y de seguimiento de la terapia aplicada a los pacientes, recientemente la utilización de la PCR en tiempo real de muestras clínicas y tejidos facilita la obtención de un resultado en menos de tres horas, reduce la probabilidad de contaminación en la muestra y el método permite cuantificar la carga del patógeno lo que favorece la identificación del estado de infección en el paciente.
Tomado de:
domingo, 28 de octubre de 2018
ALTERACIONES EN LA EPIGENÓMICA
Mediante mecanismos de células T que eliminan al PCP las
cuales se vinculan a distintos fenotipos de macrófagos alveolares (MA). Incluso
el interferón gamma (IFN-γ), citoquina producida por las células CD4 + T
helper 1 (Th1),que adapta macrófagos en reposo a células con propiedades
proinflamatorias. las mismas que son macrófagos activados o M1. Las
respuestas de CD4 + T helper 2 (Th2) producen las IL-4 e IL-13,
que comparten la subunidad alfa del receptor IL-4 (IL-4Rα). En contraste
con los macrófagos del fenotipo M1, IL-4 e IL-13 inducen un fenotipo de
macrófagos M2 con propiedades antiinflamatorias de igual manera
el tratamiento con el agente inmunomodulador sulfasalazina (SSZ) redujo la
inmunopatogénesis del PCP y aceleró la depuración del organismo. Los
beneficios de la SSZ se asociaron con un aumento en la abundancia de macrófagos
con el fenotipo M2 y la fagocitosis AM mejorada de Pneumocystis.
Tomado de:
domingo, 21 de octubre de 2018
ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN
Se aislaron mutantes de PC-eRF3 y SC-eRF1 que restauran el crecimiento celular PC-eRF3 como la única fuente de eRF3. El mapeo de la mutación en la ultima estructura de la cadena tridimensional dio a conocer que su ubicación era en el interfaz de union entre eRF1 y eRF3, al igual que en los sitios ribosómicos. Se observo un nuevo sitio funcional adyacente al sitio de decodificacion de eRF1 en el dominio de la punta que imita el bucle del anticodón de ARNt. este dominio probablemente tiene acción en el reconocimiento de codones junto con la función GTPasa.
Tomado de:
sábado, 13 de octubre de 2018
ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN
Usando el enriquecimiento de conjunto de genes (GSEA), se identifica en una muestra de P. jirovecii obtenida de un ser humano existen distintos grupos funcionales de Msgs, el mismo que es un gen multicopia que codifica la principal glucoproteína del hongo ( Major Surface Glicoprotein). En toda la secuencia genómica Msgs del Pneumocystis se manifiesta una sola copia en cada organismo lo que concluye que cada gen se expresa en una secuencia conservada de copia unica ( UCS) con la capacidad de recombinarse y permitir su transcripción. Esta expreción de Msgs le otorga la variabilidad antigénica al Pneumocystis.
Tomado de:
https://www.nature.com/articles/ncomms10740?origin=ppub
Tomado de:
https://www.nature.com/articles/ncomms10740?origin=ppub
sábado, 29 de septiembre de 2018
ALTERACIONES EN LA GENÓMICA
Mutación genómica de Pneumocistis jirovecii
- Íntimamente ligado con (ITS) genotipos UCS 1,2,3/ a,b,b,c con una mayor severidad en PcP.
- La presencia del genotipo UCS 1,2,3,3/ a,b,b,c se asocia a infecciones persistentes.
- La presencia del genotipo UCS 1,2,3/ b,b,c se asocia con pacientes con trasplante de riñón.
- La precencia de citosina se en la posición 85 del gen mt LSU rRNA se asocia con la reacción favorable del PcP.
Sin embargo también existen mutaciones del gen que codifica para DHPS asociadas a la disminución de la sensibilidad de Pneumocistis jirovecii a las sulfamidas.
https://academic.oup.com/mmy/article/51/6/561/974851?searchresult=1#16829619
http://www.microbiologyresearch.org/docserver/fulltext/jmm/62/8/1170_jmm057794.pdf?expires=1539485806&id=id&accname=guest&checksum=38A38BF3EAE6ADA43A110ACF9DAC137A
domingo, 23 de septiembre de 2018
Neumonía causada por Pneumocystis jirovecii
La neumonía es una infección que inflama los sacos aéreos y los llena de liquido o de pus. Causada principalmente por bacterias, virus y hongos. La neumonía causada por Pneumocystis jirovecii (PCP) afecta principalmente a pacientes con un sistema inmune bajo (VIH) o a personas que consuman fármacos inmunosupresores; Se propaga a través del aire y provoca diversos síntomas: Dificultad para respirar, Dolor en el pecho, Fatiga y Fiebre.
jueves, 20 de septiembre de 2018
Bienvenidos
Les doy la bienvenida a mi blog.
Espero que lo disfruten y que se diviertan. Este espacio tiene como fin convertirse en un sitio en el que existan aportes académicos los cuales nos ayudan a mejorar en nuestro aprendizaje.
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